生物安全柜是在操作原代培養物、菌毒株以及診斷性標本等具有感染性的實驗材料時,用來保護操作人員、實驗環境及實驗材料,防止其暴露于實驗中產生的危險性或潛在危險性生物氣溶膠或濺出物的負壓通風安全裝置。其廣泛應用于微生物學、生物醫學、醫療衛生、食品衛生、環境監測、基因工程、生物制品、疾病預防與控制等領域的科研、教學、臨床檢驗和生產中,是微生物實驗室的重要設備,也是防止實驗室獲得性感染的主要設備,更是保障生物安全和環境安全的重要基礎。
生物安全柜的工作原理主要是將柜內空氣向外抽吸,使柜內保持負壓狀態,通過垂直氣流來保護工作人員,外界空氣經高效空氣過濾器過濾后進入安全柜內,以避免處理樣品被污染;柜內的空氣也需經過HEPA過濾器過濾后再排放到大氣中,以保護環境。
根據生物安全防護水平的差異,生物安全柜可分為一級、二級和三級三種類型:
一級生物安全柜可保護工作人員和環境而不保護樣品,一級生物安全柜本身無風機,依賴外接通風管中的風機帶動氣流,由于不能對試驗品或產品提供保護,目前已較少使用;
二級生物安全柜是目前應用最為廣泛的柜型。按照規定,二級生物安全柜依照入口氣流風速、排氣方式和循環方式可分為4個級別:A1 型,A2 型,B1型和B2 型。所有的二級生物安全柜都可提供工作人員、環境和產品的保護;
三級生物安全柜是為4級實驗室生物安全等級而設計的,是目前世界上最高安全防護等級的安全柜。柜體完全氣密,100%全排放式,所有氣體不參與循環,工作人員通過連接在柜體的手套進行操作,俗稱手套箱,試驗品通過雙門的傳遞箱進出安全柜以確保不受污染,適用于高風險的生物試驗。
我們在開始工作以前,要記得清除生物安全柜內表面的污染并進行殺菌處理,操作時應注意:
1.應穿著個體防護服并戴手套防止被污染;
2.避免胳膊在前開口處快速移動和頻繁進出;
3.盡量避免污染的物品進入潔凈區;
4.在生物安全柜內進行操作時,不要進行文字工作;
5.盡量減少操作者背后的人員活動;
6.禁止在生物安全柜內使用明火;
7.一旦實驗過程中產生溢灑物,用消毒紙巾置于其表面吸附清理;
8.從安全柜內部拿取可能產生污染的物品時,一定要進行表面消毒處理;
9.盡量使安全柜處于持續工作狀態,并對所有物品進行表面消毒處理,提供最大程度的人員保護。
使用完畢后的處理事項如下:
1.系緊用過的生物廢物袋;
2.對安全柜內壁、后壁、工作臺面和前窗內側進行清潔和消毒處理;
3.由于剩余的培養基可能會使微生物生長繁殖,因此在實驗結束時,包括儀器設備在內的所有物品都應清除表面污染,并移出安全柜;
4.從安全柜內移出手臂之前,一定要進行表面消毒處理,然后垂直于工作區開口緩慢地移出;
5.在每次使用后,要清除生物安全柜內表面的污染。工作臺面和內壁要用消毒劑進行擦拭,所用的消毒劑要能夠殺死安全柜里的任何微生物。在每天實驗結束時,應擦拭生物安全柜的工作臺面、四周以及玻璃的內外側等部位來清除表面的污染。在對目標生物體有效時,可以采用漂白劑溶液或70%酒精來消毒。在使用如漂白劑等腐蝕性消毒劑后,還必須用無菌水再次進行擦拭;
6.關閉前操作窗口并開啟紫外燈。
對于生物安全柜的選擇,最基本取決于生物試驗中所使用的試驗品類型:
1.如果生物試驗中只涉及微生物樣品,可以使用基本類型的生物安全柜。
2.如果生物試驗中涉及微生物樣品與微量化學試劑(非腐蝕性),使用裝備外排管道的安全柜是必要的。
3.如果生物試驗中涉及了細胞毒素類藥物,例如,各類癌癥治療藥物,必須使用的細胞毒素安全柜。
另外,需要提醒的是生物安全柜與通風柜或超凈工作臺有著明確的區分,通風柜和超凈工作臺不屬于生物安全柜,不可使用在涉及微生物材料的實驗或生產過程中。
最后,生物安全柜最好每周采用空氣落菌數相似的方法進行無菌檢查,每三個月更換一次過濾器,每年更換一次紫外燈。生物安全柜在移動以及更換過濾器之前,必須清除污染,最常用的方法是采用甲醛熏蒸,應由有資質的專業人員來清除污染。